豬ES細(xì)胞(小鼠胚胎細(xì)胞)介紹

　　Piedrahita J A等采用STO、(小鼠胚胎細(xì)胞)豬成纖維細(xì)胞和豬子宮上皮細(xì)胞作為飼養(yǎng)層，以DMEM為基礎(chǔ)培養(yǎng)液，從豬囊胚ICM分離ES細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)豬囊胚ICM在STO或PMEF飼養(yǎng)層上可以附著增殖，而在豬胎兒成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上雖可附著但增殖甚微，傳不過4代即發(fā)生死亡。Evans等將6天～7天豬囊胚直接培養(yǎng)于STO飼養(yǎng)層上，挑出ICM細(xì)胞經(jīng)增殖傳代培養(yǎng)建立了豬ES細(xì)胞系。Strojek R M等認(rèn)為分離豬ES細(xì)胞的*適胚胎為第10天囊胚。研究表明，6日齡～7日齡胚胎在培養(yǎng)過程中極易發(fā)生死亡，ICM克隆獲得率極低，而第10天的胚胎容易培養(yǎng)，ICM克隆獲得率較高，但(小鼠胚胎細(xì)胞)細(xì)胞易于分化。Vasil’ev I M等研究了胚胎發(fā)育階段、培養(yǎng)基種類、飼養(yǎng)層細(xì)胞等影響豬ES細(xì)胞分離的因素，結(jié)果表明不同發(fā)育階段的附植前囊胚是影響豬ES細(xì)胞分離的限制性因素。Wheeler M B等報(bào)道豬ES細(xì)胞能形成正常的嵌合體和包含三胚層分化物的囊狀胚體，在維甲酸和DMSO的作用下，豬ES細(xì)胞能分化形成上皮細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等，Miyoshi等從體外授精囊胚分離得到豬ES細(xì)胞，并以類ES細(xì)胞為核供體，獲得了核移植囊胚。國內(nèi)關(guān)于豬ES細(xì)胞分離克隆的研究相對(duì)較少，李松等分離得到豬ES細(xì)胞并傳至第2代，在此基礎(chǔ)上，徐軍等將豬ES細(xì)胞傳至3代，馮秀亮等將豬ES細(xì)胞傳至5代，馮書堂等也分離得到豬ES細(xì)胞，同時(shí)對(duì)所分離的細(xì)胞進(jìn)行了初步檢測和鑒定，證明其具有多能性。

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